Chlorophyll se yon pigman vèt yo jwenn nan plant ki pi wo yo ak tout lòt òganis fotosentetik. Chlorophyll A ak klowofil B yo idrosolubl nan etanòl, etè ak asetòn ak lòt solvang, ensolubl nan dlo ak etè petwòl, Se poutèt sa, ka itilize solvang polè tankou asetòn, metanol, etanòl, acetate etil ak sou sa yo ekstrè klowofil.
Pwosesis ekstraksyon klowofil:
Ekstraksyon klowofil prepare nan yon chanm semi-nwa a 25 degre C. Etap ekstraksyon yo se jan sa a:
(1) Pran 1000 gram fèy vèt fre epi kraze yo nan yon Wechsler.
(2) Mete 1000 gram fèy vèt yo kraze nan asetòn ak yon ti kantite kabonat kalsyòm (tanperati 20 degre) pou fè ekstraksyon, jiskaske fragman fèy yo san koulè apre filtraj ak netwaye.
(3) Mete ekstrè asetòn filtre a nan yon antonwa ki gen 1 lit etè petwòl ak 100mL asetòn, epi vire dousman, pandan w ap ajoute dlo distile jiskaske yo stratifye. Pifò nan asetòn ak enpurte idrosolubl nan kouch dlo a yo jete, kite sèlman solisyon etè petwòl.
(4) Apre solisyon etè petwòl la pirifye ankò ak dlo distile, netwaye li plis pase 5 fwa ak 200ml80 pousan solisyon metanol ki gen etè petwòl ak 0.01g asid oksalik, epi finalman jwenn sispansyon jòn-vèt. .
(5) Seche sispansyon an ak silfat sodyòm anidrid, epi enfiltre li nan yon kolòn ki fèt ak poud sikwoz 3cm epè. Lè sa a, netwaye pigman presipite yo retire karotenoid epi fè yo sèlman gen klowofil natirèl.
(6) Kolòn sikwoz ki gen klowofil natirèl divize an de kouch, kouch vèt la gen yon kouch klowofil B 4-10mm, lòt kouch ble a se yon kouch klowofil A 2-6mm.
(7) Pati ki sitiye nan mitan kouch ble a (apeprè mwatye kouch ble a) mete nan etè, sispansyon an filtre ak ekstrè, netwaye ak dlo distile, seche ak silfat sodyòm, epi filtre ak istansil pou jwenn klowofil. A.
(8) Retire pati mitan kouch vèt la nan (6), epi byen vit mete l nan etè a pou filtre ak lave pou fè solisyon klowofil B etè.
Ki jan yo separe pandan ekstraksyon?
Kwomatografi se yon metòd enpòtan pou separasyon, pirifikasyon ak idantifikasyon nan konpoze òganik, espesyalman nan mikroanaliz se lajman ki itilize. Pigman nan fwi ak legim sitou gen ladan karotèn grès-idrosolubl, lutein, klowofil ak anthocyanin idrosolubl. Nan eksperyans fè ekstraksyon, nou ka sèvi ak prensip filtraj anthocyanin dlo-idrosolubl miscibilite menm jan an, ki an vire ka sèvi ak chromatografi kouch mens, kolòn chromatografi, segondè pèfòmans likid chromatografi (HPLC) nan separasyon beta-karotèn, lutein. ak klowofil, febli akòz polarite twa kalite pigman yo nan vire, yo ka apwopriye chwazi yon sèl sòlvan òganik oswa diferan rapò nan sòlvan melanje kòm ajan ekspansyon ak ajan elisyon, Kondisyon yo separasyon optimal yo te detèmine.
